Загальна інформація
Застосування

Схема досліду
Біотехнологічні методи вже багато років є усталеними способами виробництва органічних речовин. Мало не щодня перелік продуктів, вироблених бактеріями, дріжджами або культурами клітин, стає довшим.
Більшість цих продуктів виробляють у біореакторах (ферментерах), у яких можна точно регулювати перемішування, аерацію, значення pH, температуру, концентрацію кисню тощо.
У цьому досліді мелясу (=відхід виробництва цукру) зброджують до етанолу так званим періодичним (batch) способом.
Інша інформація (1/4)
Додаткова інформація (1/4)
Попередні знання

Студенти вже мають ознайомитися з основами біотехнології.
Принцип

Мелясу (=відхід виробництва цукру) зброджують до етанолу так званим періодичним (batch) способом.
Інша інформація (2/4)
Додаткова інформація (2/4)
Навчальна мета

Студенти дізнаються, що за допомогою біотехнології можна, використовуючи дріжджі, зброджувати мелясу до етанолу.
Завдання

Студенти за допомогою дріжджів зброджують мелясу до етанолу. Потім у цьому дистиляті вони визначають вміст спирту.
Інша інформація (3/4)
Додаткова інформація (3/4)

Панель для розміщення експериментального обладнання
Спостереження та опрацювання
Затор зброджують упродовж 24 годин, а потім переганяють. Для цього тримачі закріплюють на другій панелі для розміщення експериментального обладнання, після чого установку збирають для виконання дистиляції, як показано на рисунку ліворуч. Оскільки меляса сильно схильна до піноутворення, тут між перегінним кубом і перегінним містком уставляють насадку, яка має запобігти тому, щоб піна, що забруднила б дистилят, піднімалася аж у холодильник. Дистиляцію припиняють, коли температура пари дистиляту починає підніматися вище 78-80°C.
Інша інформація (4/4)
Додаткова інформація (4/4)
Спостереження та опрацювання (2/2)
Після дистиляції дистилят зважують і за густиною (пікнометр) визначають вміст спирту. За густини, наприклад, 0,9887 г/мл дистилят містить, згідно з таблицею (пор. KV 1.4), 6,5% етанолу, тобто 65 г етанолу/л. На початку процесу бродіння в одному літрі меляси містилося 150 г цукру (дані цукрового заводу). За повного зброджування з нього за рівнянням реакції
C12H22O11 + H2O --> 4C2H5OH + 4CO2
мало б утворитися 80,7 г етанолу. Отже, вихід становить
Правила безпеки



- Щодо H- і P-фраз звертайтеся, будь ласка, до відповідних паспортів безпеки.
- Для цього досліду діють загальні правила безпечного експериментування на уроках природничих наук.

Теорія (1/2)
Через нестачу енергії та зростання екологічної свідомості біотехнологічні методи виробництва вже певний час стрімко поширюються. Мало не щодня перелік продуктів, вироблених бактеріями, дріжджами або культурами клітин, стає довшим.
Біореактори (ферментери) - найважливіші реакційні посудини в біотехнології, у яких можна точно регулювати перемішування, аерацію, значення pH, температуру, концентрацію кисню та інші параметри.
Спектр біореакторів сягає від лабораторної посудини на 1 л до великого резервуара місткістю 1000 кубічних метрів. Однак для застосування на заняттях такі біореактори надто складні. За відповідного добору прикладів дослідів можна обійтися без складного автоматичного керування, без здатності всіх частин до стерилізації, а також без створення строго анаеробних (бідних на кисень) умов досліду. За потреби до суспензії меляси можна додати проти бактеріального забруднення 3 мл формаліну (4%-й розчин).
Теорія (2/2)
Бульбашковий біореактор - це дуже простий, але цілком достатній для практикумних дослідів біореактор. Прилад складається з довгої скляної трубки з можливістю термостатування, у яку вставлено вкладку, що сягає аж до вістря. Нижній отвір слугує для аерації, обидва верхні отвори - для додавання поживних розчинів або відбирання кінцевих продуктів. Для термостатування біореактор можна за допомогою обох бічних шлангових штуцерів увести у водяний контур.
У цьому досліді мелясу (= відхід виробництва цукру) зброджують до етанолу так званим періодичним (batch) способом. Ідеться про періодичне зброджування, тобто через певний час бродіння припиняють і збирають продукт бродіння. Після цього біореактор знову запускають із новим наповненням („Batch”). Проте останнім часом утвердилося неперервне зброджування, бо воно потребує значно менше робочого часу на кілограм кінцевого продукту. За цього способу до біореактора постійно додають вихідні речовини й відбирають кінцеві продукти. Бульбашковим біореактором можна виконати і цей метод. Пляшку над біореактором передбачено для подавання затору, який треба зброджувати, а пляшка під біореактором приймає зброджений затор.
Обладнання
Складання та виконання
Складання і виконання
Складання та виконання - частина 1
Складання (1/4)
Спершу готують суспензію з меляси, поживних солей, дріжджів і олеїнової кислоти (піногасник):
- 83,3 г меляси
- 0,3 г кашки з поживних солей
- 3,0 г свіжих дріжджів
- 2 краплі олеїнової кислоти
Кашка з поживних солей складається з:
- 50 g Ca(H2PO4)2 * H2O
- 20 g (NH4)2H2O
- 5 g MgSO4 розчинені у 75 мл водопровідної води
Складання та виконання - частина 2
Складання (2/4)

Панель для розміщення експериментального обладнання
- Суспензія, яку треба зброджувати (її ще називають „затором”), має мати pH від 5 до 6. За значень pH, що відрізняються від цих, треба відрегулювати розчином гідроксиду натрію або сірчаною кислотою.
- Тримачі встановлюють на панелі для розміщення експериментального обладнання (рис. ліворуч). Після цього установку збирають і закріплюють на тримачі (рис. «Схема досліду», слайд 2). Для цього спершу внутрішню трубку (d = 18 BB) вводять до упору крізь ущільнювальне кільце гвинтового ковпачка GL 32 і закріплюють, підкручуючи гвинтовий ковпачок.
- Тримачі із затискачем можна зафіксувати металевими скріпками на зворотному боці перфорованої панелі.
Складання та виконання - частина 3
Складання (3/4)
- Для аерації біореактора на нижньому кінці вставляють скляну трубку із загостреним кінцем так, щоб вістря закінчувалося саме над бічними отворами у внутрішній трубці.
- Скляну трубку за допомогою силіконового шланга приєднують до акваріумного насоса.
- Надто тонкий приєднувальний патрубок акваріумного насоса збільшують у діаметрі за допомогою шматочка 4-мм шланга.
- Насос треба встановити вище за біореактор, щоб досліджувана суспензія при вимкненому насосі не могла потекти назад і забруднити насос.
- Щоб установити сталу температуру в біореакторі, обидва шлангові штуцери зовнішньої скляної сорочки приєднують до циркуляційного термостата.
- Якщо ж кімнатної температури для виробничого процесу достатньо (30°C), то від зовнішнього термостатування можна відмовитися.
Складання та виконання - частина 4
Складання (4/4)
- Вузькогорлу скляну пляшку закріплюють на перфорованій стінці за допомогою тримача для приладів із магнітними кріпленнями і фіксують липучкою.
- Центральний верхній отвір біореактора з'єднують за допомогою зігнутої скляної трубки та силіконового шланга зі скляною пляшкою, яка виконує роль запобіжного переливу. Отвір пляшки навколо шланга закривають ватою.
- Бічний верхній отвір біореактора в періодичному режимі закривають гвинтовим ковпачком. У неперервному режимі сюди надходить затор, який треба зброджувати.
- Як резервуар для запасу тоді закріплюють однолітрову відстійну пляшку тримачем для приладів на верхньому краю панелі.
- Вентиляційною трубкою, закріпленою у верхньому отворі пляшки, забезпечують рівномірне надходження затору.
Складання та виконання - частина 5
Виконання
- Біореактор наповнюють затором, який треба зброджувати, приблизно на 1 см вище за верхній кінець внутрішньої трубки.
- Після ввімкнення акваріумного насоса у внутрішній трубці піднімаються вгору бульбашки повітря і водночас створюють рух суспензії у внутрішній трубці вгору.
- Дійшовши догори, суспензія в середній трубці знову опускається вниз і там знову входить у внутрішню трубку крізь спеціально передбачені для цього отвори. Отже, бульбашки повітря забезпечують постійне перемішування суспензії; тож без мішалки з мотором можна обійтися.
- Подачу повітря регулюють за допомогою затискача для шланга так, щоб у внутрішній трубці панували аеробні умови (розмноження дріжджів), а в середній трубці - анаеробні умови (зброджування затору). Для цього треба вдувати від 5 до 10 мл повітря за хвилину.
Протокол
Завдання 1
Питання
Завдання 2
Питання
Завдання 3
Питання